| 產品簡介

純化效果檢測：
取2-5μl得到的DNA產物，0.7%agarose電泳檢測DNA分子的完整性和紫外分光光度計檢測濃度和純度。
DNA在260nm處有吸收峰，檢測時應該使OD₂₆₀值在0.1到1.0之間數值較準確。
OD₂₆₀為1時大概相當于50μg/ml雙鏈DNA，40μg/ml單鏈DNA。
核酸濃度（μg/ml）=OD₂₆₀×50×稀釋倍數。
OD₂₆₀/OD₂₈₀的值應該為1.7~2.0。
常見問題分析：

   Wash buffer A中加入18 ml 無水乙醇，充分混勻。
   Wash buffer B中加入64 ml無水乙醇，充分混勻。
   儲存條件：  請按照上表中注意事項的條件保存，其他未說明的可常溫或4度保存。
   步驟：
   1、樣品處理
   全血：取50-300 μl全血，加入3倍體積的紅細胞裂解液，震蕩混勻，12000rpm離心1min，
   去上清。加入600 μl Lysis Buffer A，震蕩混勻。
   禽血：加入10-100 μl禽血，直接加入600 μl Lysis Buffer A，顛倒混勻。
   動物組織：取20-50mg動物組織，液氮研磨或勻漿，加入100 μl PBS重懸樣品，
   然后加入到準備好的600 μl Lysis Buffer A，振蕩混勻。
   動物細胞：離心收集10⁵-10⁶個培養(yǎng)細胞，加入100 μl PBS重懸細胞，
   加入600 μl Lysis Buffer A，震蕩混勻。
   2、 加入10 μl Proteinase K，60 ℃水浴20 min～40 min，其間顛倒混勻數次。
   如需消化RNA,可待樣品裂解完全后加入10 μl RNase A，混勻，室溫放置10 min。
   若加入樣品較多，可適當延長水浴時間，適量增加Proteinase K的量，按比例增加
   Lysis Buffer A和Lysis Buffer B量。此步驟可以過夜處理。
   3、 加入400 μl Lysis Buffer B，漩渦震蕩30 s。
   4、 12,000 rpm離心5 min，將上清轉入離心柱中，靜置2 min。
  上清可能出現少量白色漂浮物，此為未消化完全的細胞和蛋白質。
   5、 12,000 rpm離心1 min，棄廢液。
   6、 加入700 μl Wash buffer A（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），12,000 rpm離心 1min，棄廢液。
   7、 加入700 μl Wash buffer B（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇）， 12,000 rpm離心1min，棄廢液。
   8、 加入500 μl Wash buffer B，12,000 rpm離心1 min，棄廢液。
   9、 再次12,000 rpm離心2 min，將離心柱置于新的離心管中，并打開離心柱蓋，于室溫或37 ℃恒溫箱放置5~10min，
  直至無明顯乙醇味。
  10、 在硅基質膜中央加入50～200 μl Elution Buffer或雙蒸水(事先預熱55～65 ℃)，置于室溫2 min，12,000 rpm離2 min。
   所得液體即為基因組DNA溶液。



 

更新時間:2024/9/23 10:42:56