產品名稱：重組蛋白G抗體ProteinG免疫組化試劑盒

規格價格：以IHC工作液每個樣品用量為100ul來計算，按照稀釋比例1:400來計算，本試劑盒中一抗規格100ul可以檢測400個樣品以上。

保存條件：不使用時取試劑盒中一抗保存-20℃，其他均保存 2-8 ℃

試劑盒特點：利用LAB-SA第二代技術生產的免疫組化檢測試劑，特點是高靈敏度，特異性強、定性定位準確、背景清晰等、低倍景染色，直接滴加，操作方便，孵育時間短，適用于冷凍切片、石蠟切片及固定的細胞涂片。可用于檢測細胞、組織內的特異性抗原。

溫馨提示：本檢測試劑盒適用于人、大小鼠，兔等絕大多數組織，但對于內源性生物素含量比較豐富的組織（如腎臟、肝臟等），應選用非生物素檢測系統，或用avdin 封閉。
產品特點

重組蛋白G抗體ProteinG免疫組化試劑盒含試劑：

1、一抗（應用：IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 ）

2、無色試劑：內源性過氧化物酶阻斷劑

3、試劑A：封閉用正常山羊血清工作液

4、試劑B：生物素標記二抗工作液：生物素標記羊抗兔IgG

5、試劑C：辣根酶標記鏈酶卵白素工作液

6、顯色液D液 (棕色) 1ml

7、顯色液E液（白色）20ml
產品相冊

用戶自備試劑（用戶自行購買，亦可咨詢我公司客服購買）：

一、0.1M PBS (pH7.2-7.4)緩沖液：

PBS（phosphate buffered solution）即磷酸鹽緩沖液，能夠提供相對穩定的離子環境和pH緩沖能力，是生物學中經常使用的緩沖鹽溶液，用于分子克隆及細胞培養等，pH為7.2-7.4，與人體血液等滲，主要成分為磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉、氯化鈉以。

二、檸檬酸鈉抗原修復液：

可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復。可以有效去除醛類固定試劑導致的蛋白之間的交聯，充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。

抗原修復方法：

方法1：沸水浴修復，將盛有修復液和玻片的燒杯置于沸水浴環境，保持外部沸騰狀態15min，自然冷卻至室溫。

方法2：微波修復，將盛有修復液和玻片的燒杯置于微波爐中，高火5min，停火3min，中火5min，自然冷卻至室溫。

方法3：高壓修復，將盛有修復液和玻片的燒杯置于高壓鍋，上汽后修復2-5min，然后將高壓鍋置入涼水中，減壓至正常后取出玻片

抗原修復注意事項：

1）脫蠟水化的切片，應避免因切片干燥，而至非特異性染色。

2）熱修復操作時務必謹慎，當心燙傷。

3）熱修復時間過長易導致脫片，請注意控制時間。

三、DAB（二氨基聯苯胺）染色液：

過氧化物酶將使底物發生反應，于反應部位產生棕色沉淀物。標本顯色時間一般為室溫 5~20分鐘，請在顯微鏡下觀察顯色況，顯色充分后應將標本及時脫水封固。

重組蛋白G抗體ProteinG免疫組化試劑盒實驗前準備：

安裝步驟與維護一）一抗稀釋的準備：

方法1. 實驗前，將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋（或PBS稀釋），將稀釋后的抗體分裝5-10支（20ulx5支或10ulx10支），放入-20℃保存，用一支拿一支，避免反復凍溶。

方法2. 實驗前,也可將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋50ul（或PBS稀釋50ul）成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存，用多少吸多少。

方法3. 預試驗可做幾個梯度1：100、200、400背景高還可做上去，選一個適合的稀釋比例，再正式做。工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。

二）DAB顯色液的制備實驗準備：在1毫升試劑E（DAB 底物液）中，加入1滴（約50微升）試劑D（DAB濃縮液），混合均勻，即配成DAB工作液。此溶液必須現用現配，配好后避光保存，6小時內使用，剩余的液體應棄去。標本顯色時間一般為室溫 5~20分鐘，請在顯微鏡下觀察顯色的情況，顯色充分后應將標本及時脫水封固。

重組蛋白G抗體ProteinG免疫組化試劑盒實驗步驟（建議方案）：

1、石蠟切片，常規脫蠟至水

2、蒸餾水沖洗，pbs 浸泡5 分鐘（如需采用抗原修復，在此步驟后進行）。

3、3%雙氧水去離子水（無色液體）孵育15-20 分鐘，以消除內源性過氧物酶活性。

4、滴加試劑A（藍色液體）室溫孵育15-20 分鐘，傾去，勿洗。

5、滴加適當比例稀釋的一抗，37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。

6、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

7、滴加試劑B（黃色液體），室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

8、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

9、滴加試劑C（橙色液體），室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

10、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

11、顯色劑顯色（DAB 或AEC）

12、自來水充分沖洗。

13、如果需要，可進行復染，脫水，透明。

14、選擇適當的封片劑封片。
訂購流程

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